OVCA2在胰腺癌发生发展中的作用机制研究
魏婷1 欧阳雯浍2 王洁2 陈洁2 林语嫣3 钱佳孜3 吕建新4 杜苗苗4 桂善颖2*
该研究旨在探讨OVCA2对胰腺癌细胞发生发展中的作用及调控机制。通过生信分析 OVCA2在胰腺癌中的表达及预后的相关性, 结合免疫组化验证OVCA2在癌症中的表达水平; 利用 细胞计数和集落形成实验研究OVCA2对胰腺癌细胞增殖影响, 细胞凋亡实验检测OVCA2对胰腺 癌细胞凋亡影响及细胞周期实验检测OVCA2对周期的作用; 通过免疫荧光的共定位分析及细胞亚 定位研究OVCA2定位; 利用线粒体功能实验检测OVCA2对线粒体功能的效应; 通过IP测序及转录 组学分析OVCA2代谢变化, 通过Western blot验证信号通路蛋白变化。结果表明, OVCA2在多种癌 症中低表达, 但这只与胰腺癌预后相关; 过表达OVCA2后, 胰腺癌细胞的增殖、集落形成能力显著 降低, 凋亡的比率显著上升, 而敲低的细胞系表型结果与之相反; OVCA2在线粒体中定位于线粒体 外膜且OVCA2过表达抑制胰腺癌细胞的线粒体功能, 包括细胞氧呼吸能力、ATP生成能力、超级 复合体组装能力、mtDNA拷贝数和mRNA转录能力等; VCA2过表达显著增强胰腺癌细胞的氧化 压力, 如ROS水平及NADP+/NADPH比率; OVCA2敲低则获得相反结果; 而IP测序分析显示, 过表达 OVCA2上调TNF信号通路, 下调Wnt信号通路; 转录组学显示OVCA2敲低增强线粒体功能且下调 TNF信号通路, 而Western blot验证了OVCA2调节TNF、Wnt信号通路促进细胞凋亡。这些结果表 明胰腺癌细胞中OVCA2高表达抑制癌细胞存活, 促进体内ROS的过度蓄积, 进一步通过促进TNF 等信号通路中凋亡蛋白的表达促进细胞凋亡, 从而促进癌细胞的死亡, 而OVCA2的低表达通过抑 制TNF信号通路诱导的细胞凋亡, 维持细胞内OXPHOS功能及促进肿瘤的发生, 明确OVCA2在调 控胰腺癌中的机制, 提示通过增强OVCA2的表达发挥抑癌作用可能成为胰腺癌治疗的新策略。
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