嵌合Neurturin在恒河猴脂肪间充质干细胞中的表达及定向诱导作用
周 艳 孙茂盛 李鸿钧* 王晚璞 谢天宏
中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所, 昆明 650118
摘要 : 该研究通过重组腺病毒传递嵌合型Nerve growth factor(NGF)/Neurturin(NTN)至恒河
猴脂肪间充质干细胞(rhesus adipose mesenchymal stem cells， rASCs)中， 评价嵌合型NGF/NTN在诱导该细胞为神经元细胞中的作用， 为进一步探讨ASC-NTN体内修复帕金森氏病猴模型潜能提供实验基础。用带有NGF/NTN嵌合基因的重组腺病毒感染rASCs， 通过RT-PCR、免疫荧光及ELISA检测重组NTN在rASCs的表达及产物定位， 在外源化学诱导剂协同作用下对rASCs进行诱导。rAd-NGF/NTN感染rASCs后检测到NGF/NTN转录产物， 表达产物可分泌到细胞外， 分泌出的NTN蛋白在体外能够促进鸡胚背根神经节长出神经突起， 维持胎鼠中脑神经元的存活。rASCs在内外源性诱导因素诱导下可向神经元样细胞分化。利用rAd-NGF/NTN可将NGF-NTN传递至rASCs中并表达，rASCs能够被定向诱导为具有分泌NTN作用的神经元样细胞。这些研究结果为将来rASCs-NTN移植进入帕金森氏病猴模型进行帕金森氏病治疗提供了重要依据。
猴脂肪间充质干细胞(rhesus adipose mesenchymal stem cells， rASCs)中， 评价嵌合型NGF/NTN在诱导该细胞为神经元细胞中的作用， 为进一步探讨ASC-NTN体内修复帕金森氏病猴模型潜能提供实验基础。用带有NGF/NTN嵌合基因的重组腺病毒感染rASCs， 通过RT-PCR、免疫荧光及ELISA检测重组NTN在rASCs的表达及产物定位， 在外源化学诱导剂协同作用下对rASCs进行诱导。rAd-NGF/NTN感染rASCs后检测到NGF/NTN转录产物， 表达产物可分泌到细胞外， 分泌出的NTN蛋白在体外能够促进鸡胚背根神经节长出神经突起， 维持胎鼠中脑神经元的存活。rASCs在内外源性诱导因素诱导下可向神经元样细胞分化。利用rAd-NGF/NTN可将NGF-NTN传递至rASCs中并表达，rASCs能够被定向诱导为具有分泌NTN作用的神经元样细胞。这些研究结果为将来rASCs-NTN移植进入帕金森氏病猴模型进行帕金森氏病治疗提供了重要依据。
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