第30卷 第2期（2008年4月）： 196-200

7型腺病毒E1A基因克隆及真核表达

沈鑫烽　申宝玲　黄燕燕　余雪娇　彭　颖*　吕建新*

(温州医学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 温州325035)

摘要　　为了研究7型腺病毒(Ad7) E1A在感染中的致病机制, 分离了Ad7d2病毒株, 构建了Ad7 E1A 基因的真核表达体系。用A549细胞分离培养痰液标本中的腺病毒, 应用重叠延伸PCR扩增Ad7 E1A基因外显子, 产物克隆至真核表达载体pIRES-Neo, 构建重组子pIRES-Neo-Ad7E1A并转染A549细胞, 利用Western印迹对其表达产物进行鉴定。克隆测序显示扩增的Ad7 E1A基因外显子包含了完整的编码区基因, pIRES-Neo-Ad7E1A转染A549细胞的表达产物经Western印迹鉴定与设计相符。成功建立了Ad7 E1A 基因的真核表达体系。

关键词　　7型腺病毒; E1A基因; 克隆; 真核表达

收稿日期: 2007-10-24　　接受日期: 2007-12-12
浙江省自然科学基金资助项目(No.Y205188)
*通讯作者。吕建新: Tel: 0577-86689905, E-mail: jxlu313@163.com; 彭颖: Tel: 0577-86689905, E-mail: ying7754@yahoo.com.cn