第29卷 第6期（2007年12月）： 889-894
特异性下调葡萄糖调节蛋白78表达对肝细胞癌 侵袭和转移能力的影响
苏荣健*Δ 李 贞1Δ 程留芳1 魏 嘉 李宏丹
(辽宁医学院实验中心, 锦州121001; 1解放军总医院消化科, 北京100583)
摘要 为了研究特异性下调葡萄糖调节蛋白(Grp)78对肝细胞癌侵袭和转移能力的影响。通过小干扰RNA(siRNA)技术特异性下调人肝细胞癌细胞株BEL7402中Grp78的表达, 并应用Transwell法和划痕法对肝细胞癌侵袭、转移能力的改变进行分析, 应用免疫沉淀技术和GST-pulldown技术分别对黏着斑激酶(FAK)的磷酸化水平和小GTPase RhoA的活性进行研究, 应用免疫印迹技术检测E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白和波形蛋白的表达。结果发现, Transwell实验和划痕实验结果显示特异性下调Grp78 表达可以抑制肝细胞癌的侵袭和转移, 免疫沉淀结果显示特异性下调Grp78表达可以降低FAK的磷酸化水平, GST-pulldown实验结果表明特异性下调Grp78表达可以上调RhoA的活性。免疫印迹实验结果表明特异性下调Grp78可以下调N-钙黏着蛋白、波形蛋白的表达, 上调E-钙黏着蛋白的表达。结果表明特异性下调Grp78在体外可以抑制肝细胞癌的侵袭和转移, 这种抑制作用是通过FAK脱磷酸化和抑制肿瘤的上皮-间叶转化实现的。
关键词 肝细胞癌; 侵袭和转移; 黏着斑激酶; RhoA; 上皮-间叶转化
收稿日期: 2007-06-05 接受日期: 2007-08-30
辽宁省自然科学基金资助项目(No. 20061074)
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*通讯作者。Tel: 0416-4673183, E-mail: rongjiansu@yahoo.com.cn