第29卷 第3期（2007年6月）： 449-453
运用植块法培养脑微血管内皮细胞
祝慧凤 万 东1 王建伟2 罗 勇1 徐晓玉*
(西南大学药学院暨中医药学院, 重庆400716，1重庆医科大学附属第一医院神经内科, 重庆400016; 2重庆医科大学组胚教研室, 重庆400016)
摘要 探讨简易可行的脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells, BMECs)培养方法, 为研究BMECs细胞在脑血管疾病中的重要作用提供技术支持。分离出生后1~7天内的SD乳鼠大脑皮质区, 植块法培养BMECs细胞。用倒置显微镜观察BMECs细胞的形态以及从皮质块迁出的过程; MTT 比色法检测BMECs细胞的生长曲线; 采用免疫组化染色检测VIII因子相关抗原和CD34抗原, 以鉴定内皮细胞。结果发现, 大脑皮质块植块法培养的大鼠BMECs细胞呈单层贴壁生长, 细胞形态以长梭形、多角形三角形、四边形为主, 呈典型的“铺路石”样征象, 经鉴定为内皮细胞, 第三代纯度达95%以上。提示该方法具有经济、简便、要求条件不高, 易于纯化的优点, 可作为大鼠BMECs细胞体外培养的良好模型。
关键词 大鼠; 脑微血管内皮细胞; 植块培养
收稿日期: 2006-12-18 接受日期: 2007-02-06
国家自然科学基金(No.30070915), 重庆市科委应用基础研究项目(渝科发计字[2002]18-99)资助
*通讯作者。Tel: 023-68485275, Fax: 023-68251225, E-mail: xxy0618@sina.com.cn