第29卷 第1期（2007年2月）： 131-134

无血清原代培养大鼠海马神经元的形态与膜电位

张　明¹　郭　艺　蒋　莉*　刘官信

(重庆医科大学附属儿童医院神经内科, 重庆 400014)

摘要　　分离新生Wistar鼠海马, 采用添加B27的无血清培养液进行海马神经元原代培养, 动态观察海马神经元形态学变化; 通过免疫荧光细胞化学法检测神经纤丝(NF)的表达, 进行神经元鉴定及纯度计算; 采用电位敏感的荧光探针标记神经元, 在激光扫描共聚焦显微镜上动态监测去极化剂KCl作用前后膜电位的变化, 观察神经元电生理反应。结果表明: 此方法培养的大鼠海马神经元可在体外存活20天以上, 9～14 天为发育最成熟阶段, 培养7天神经元纯度达90%。KCl作用于细胞后胞内荧光强度增强, 细胞迅速去极化。本培养方法在体外获得高纯度的海马神经元并延长体外存活时间, 且显示出神经元的电生理反应特性。

关键词　　海马神经元; 原代培养; 形态; 膜电位

收稿日期: 2006-05-29　　接受日期: 2006-09-29

国家自然科学基金项目资助(No.30271382)

¹现在厦门大学附属中山医院

*通讯作者。Tel: 023-63624424, E-mail: dr_jiangli@hotmail.com