第28卷 第6期(2006年12月): 873-878

SV40 TAg转基因小鼠模型的建立及其表达

匡 颖 梁 斌 麻孙恺 王 珏 费 俭 王铸钢 毛积芳 *

(上海南方模式生物研究中心,上海201203)

摘要  为了建立中枢神经系统肿瘤小鼠模型,构建了大鼠神经元特异性烯醇化酶(rat neuron-specific enolase, NSE)基因启动子调控下的猿猴病毒40大T抗原基因(simian virus 40 large T antigen gene, SV40 TAg)转基因载体,通过受精卵雄原核显微注射的方法制备转基因小鼠。PCR鉴 定转基因小鼠的基因型;RT-PCR和Northern印迹检测转基因阳性鼠中SV40 TAg RNA水平的表达及其组织特异性;免疫组化检测其蛋白质水平的表达。经显微注射共获得9只首代转基因阳性 鼠(首建者,Founder小鼠),其中2例出生时即发生神经干细胞来源的肿瘤,其他Founder小鼠经 繁育后共建立了5个SV40 TAg转基因小鼠系,其中有4个系检测到SV40 TAg RNA水平的表达且特异性地表达于脑组织,但未检测到蛋白质水平的表达。研究表明NSE启动子活性具有较强的 组织特异性,并起始于小鼠胚胎发育期;SV40 TAg具有明显的致癌作用,且SV40 TAg诱发的神经系统肿瘤易造成转基因小鼠早期死亡。

关键词  猿猴病毒40大T抗原基因;大鼠神经元特异性烯醇化酶基因启动子;转基因 小鼠;神经系统肿瘤

收稿日期:2006-04-05  接受日期:2006-08-16

国家自然科学基金资助项目(No.30471948)

*通讯作者。Tel: 021-58961006, Fax: 021-58951005, E-mail: jifang@hotmail.com