第28卷 第6期(2006年12月): 855-860
OX-M-AdmCLB1重组腺病毒制备及其诱导的体内抗肿瘤效应
张 伶 魏于全1 蒋 磊 李继承 *
(浙江大学细胞生物学研究所,杭州 310031;
1四川大学华西医院肿瘤生物治疗国家重点实验室,成都 610041)
摘要 构建小鼠细胞周期蛋白B1(mcyclin B1)重组腺病毒(AdmCLB1),将氧化型甘露聚糖(OX-M)与AdmCLB1偶联,制备OX-M-AdmCLB1,研究OX-M-AdmCLB1诱导的抗肿瘤效应。利 用AdEasy系统构建携带靶基因小鼠细胞周期蛋白B1的复制缺陷型重组腺病毒AdmCLB1,抽提 AdmCLB1基因组DNA,进行PCR扩增。重组病毒经扩增、纯化后与OX-M混合,制备OX-M- AdmCLB1;OX-M-AdmCLB1体外感染小鼠树突状细胞(DC),RT-PCR扩增分析靶基因表达;OX- M-AdmCLB1处理BALB/C小鼠,处理后再荷瘤,观察小鼠肿瘤生长及生存情况。重组病毒AdmCLB1 终滴度为2.1?011 pfu/ml;DC内靶基因的表达量在OX-M-AdmCLB1组较AdmCLB1组高;体内研 究提示OX-M-AdmCLB1可明显抑制CT26肿瘤增殖(抑瘤率44%)、延长动物生存期 (P<0.01)。实验制备的新型重组腺病毒OX-M-AdmCLB1体内能够诱导明显的抗肿瘤效应,估计此效应的产生与 DC特异识别 OX-M-AdmCLB1,进而激活机体抗肿瘤免疫有关。
关键词 细胞周期蛋白 B1;氧化型甘露聚糖;重组腺病毒;肿瘤;树突状细胞
收稿日期:2006-03-31 接受日期:2006-07-27
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