第28卷 第5期（2006年10月）：711-716

重组人EGF-IL-18融合蛋白的表达纯化及复性

潘建华　彭　颖　郑昭暻　吕建新*

(温州医学院细胞与分子医学研究所，浙江省医学遗传学重点实验室，温州 325035)

摘要　　 融合基因EGF-IL-18与表达载体pET32a(+)连接构建融合型原核表达质粒pET32a(+)-EGF-IL-18。该基因在E.coli Rosetta (DE3)中获得高效表达，SDS-PAGE分析表明表达产物大部分以包涵体形式存在。以2 mol/L尿素和1% Triton X-100对包涵体进行反复洗涤后，利用离子交换柱层析对包涵体进行柱上复性，结果表明离子交换层析柱上复性不仅能够获得可溶性的EGF- IL-18融合蛋白，而且产物同时得到纯化，纯度大于90%。复性的EGF-IL-18经分子筛进一步纯化后，体外实验证明具有促进人外周血单个核细胞（PBMC）IFN-g基因表达的能力。该方法简单、高效，为进一步开展EGF-IL-18的动物实验及其大量纯化制备打下基础。

关键词　　EGF-IL-18融合蛋白；包涵体；离子交换柱层析；柱上复性

收稿日期：2006-03-08 　　接受日期：2006-05-18

浙江省自然科学基金(No.302769)和浙江省医药卫生重点科技项目(No.2001ZD007)资助

*通讯作者。Tel: 0577-86689889, E-mail: jx@wz.zj.cn