第28卷 第1期（2006年2月）：66-70

利用同源重组对酵母人工染色体左右臂进行多基因修饰

刘丽荣¹　卢步峰*　吕子卿　卢　波　张小蕾 ¹　郭礼和*

(中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，上海200031；

上海赛达生物技术研究中心，上海201203；¹ 贵阳医学院，贵阳550004)

摘要：　构建携带哺乳动物细胞筛选基因和酵母人工染色体(YAC)同源序列的载体，利用酵 母中能够发生高频率同源重组的特点对YAC分别进行左、右臂修饰，依次将NEO、EGFP及 PURO基因定点整合到YAC左右臂上。用营养缺陷筛选的方法排除酵母发生突变或随机整合等情况后， 用PCR及Southern杂交方法证实各筛选基因定点整合于YAC两臂上，从而获得携带3个哺乳动物 细胞筛选基因的YAC克隆。并且由此建立了通过同源重组将哺乳动物标记基因定点引入YAC左右 臂的多基因修饰平台。

关键词：　同源重组；酵母人工染色体；左右臂；多基因修饰

上海市科委重大项目(No.024319101)

*通讯作者。Tel: 021-50805425, Fax: 021-50803194, E-mail: yjzx@celstar.com.cn