第29卷 第4期(2007年8月):617-622

 

siRNA抑制A375细胞中黑色素形成

 

窦克军1,2* 孙春宝1

 

(1北京科技大学土木与环境工程学院, 北京 100083; 2中国科学院生物物理研究所, 系统生物学研究中心, 生物大分子国家重点实验室, 北京100101)

 

摘要  以小干扰RNA(siRNA)技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375的黑素皮质素受体1(melanocortin-1-receptor, MC1R)、小眼球相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor, MITF)基因表达, 从而抑制细胞黑色素的生成。通过RT-PCR检测MC1R、MITF、酪氨酸酶(tyrosinase, TYR)、酪氨酸酶相关蛋白l(tyrosinase related protein-1, TRP-1)基因mRNA水平的变化, 通过测定黑色素含量的变化检测蛋白水平的改变。并用台盼蓝活细胞计数法检测其对细胞增殖的影响。经RT-PCR检测, 特异性siRNA作用的靶基因显著下调, 黑色素含量明显降低。细胞增殖的变化说明, 脂质体包裹的siRNA对A375细胞的毒性远小于熊果苷等化学合成药物。结果显示, 利用siRNA对A375细胞中靶基因的调控, 有效的抑制了黑色素的生成, siRNA技术与传统的调控黑色素的方法(化学合成物——褪色剂)比较, 具有用量小、抑制效率高、细胞毒性低等优点。同时, 为进一步研究黑色素形成通路中各基因之间的的关系提供了新思路。

 

关键词  小干扰RNA; 黑色素; 黑素皮质素受体1基因; 小眼球相关转录因子基因; 酪氨酸酶

 
收稿日期: 2006-12-13  接受日期: 2007-4-23
中科院百人计划、国家自然科学基金(No.30671042)和国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2002BA711A01-22)资助项目
 

*通讯作者。Tel: 13810654997, E-mail: dkj81@126.com

 
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