第41卷 第5期(2019年5月):859-866 DOI:10.11844/cjcb.2019.05.0008

 

KCTD5对人急性单核细胞白血病U937细胞增殖的影响

 

马兰 王思恒 吴琼 徐甜 贺立彩 吕建新*  

 

(温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 温州 325035)

 

摘要  KCTD5是钾离子通道四聚体结构域(KCTD)蛋白家族的一员。KCTD5可作为Cullin3的接头蛋白发挥生物学功能, 但是其与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)的关系尚不清楚。通过对癌症与肿瘤基因图谱(the Cancer of Genome Atlas, TCGA)数据库的分析, 发现KCTD5mRNA表达水平与AML病人生存期呈显著负相关。免疫印迹(Western blot)结果显示AML细胞株中KCTD5蛋白表达量显著高于正常对照细胞。该文通过shRNA干扰技术, 敲低U937细胞中KCTD5的表达, 研究了KCTD5对人急性单核细胞白血病U937细胞增殖的影响。采用CCK8实验、锥虫蓝拒染实验、瑞氏染色、PI单染及Western blot技术, 检测干扰KCTD5对U937细胞生长、活力、细胞形态、细胞周期分布及周期相关蛋白表达的影响。结果显示, 干扰KCTD5的表达可以显著抑制U937细胞的增殖能力, 但对细胞活力没有明显影响; 形态学检查显示, 干扰KCTD5后, U937细胞体积明显增大, 染色质凝集及多核细胞比例增加; 流式结果显示, 干扰KCTD5的表达使G2/M期细胞比例明显增加; Western blot结果显示, 干扰KCTD5后, Cdk1Tyr15 磷酸化水平下降, 而Cyclin B1表达量升高。以上结果表明, 干扰KCTD5可以抑制人急性单核细胞白血病U937细胞增殖, 其机制可能是由于干扰KCTD5通过使Cdk1Tyr15发生去磷酸化, 从而诱导U937细胞发生了G2/M期阻滞。
    

 

关键词  人急性单核细胞白血病; KCTD5; 细胞增殖; G2/M期阻滞

 
收稿日期: 2019-2-28  接受日期: 2019-5-16
浙江省自然科学基金(批准号: LY18H080003)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 0577-86689805, E-mail: jxlu313@163.com

 
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