第40卷 第3期(2018年3月):318-325 DOI:10.11844/cjcb.2018.03.0220

 

SIRT2对裸鼠原位肝癌生长和肺转移的影响及其机制研究

 

杨秋霞 周洪钟 任吉华 李宛蔚 陶娜娜 程胜桃 何 琳 余海波 龚 蕊 陈 娟*

 

(重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室, 重庆 400016)

 

摘要  该文旨在探讨沉默信息调节因子2(silent information regulator 2, SIRT2)基因敲低对裸鼠原位肝癌生长和肺部转移的影响。应用杀稻瘟菌素筛选构建稳定敲低SIRT2基因的SK-Hep-1细胞, 应用定量逆转录PCR(qRT-PCR)和Western blot检测其敲低效率。将稳定敲SIRT2基因的细胞(SIRT2-shRNA-SK-Hep-1)和对照组细胞(shCont-SK-Hep-1)原位注入裸鼠肝脏, 8周后处死裸鼠并取出肝脏和肺组织, 比较两组裸鼠肝癌肿瘤的大小及肺转移结节的数量。应用Western blot和免疫组织化学检测两组裸鼠肝癌组织中SIRT2、p-AKT、AKT、p-GSK3β、GSK3β、active β-catenin和β-catenin的蛋白质水平。结果显示, 稳定敲低SIRT2基因的SK-Hep-1细胞系构建成功。裸鼠原位肝癌肺转移模型中, 相比shCont-SK-Hep-1组, SIRT2-shRNA-SK-Hep-1组裸鼠原位肝癌体积减小(P<0.05), 肺转移结节数量明显减少(P<0.05)。Western blot结果表明, 敲低SIRT2基因的裸鼠组p-AKT、p-GSK3β、active β-catenin、β-catenin蛋白质水平降低, GSK3β水平升高, AKT水平无差异; 免疫组织化学结果表明, 敲低SIRT2基因的裸鼠组p-AKT、p-GSK3β、β-catenin蛋白质水平降低。本研究结果提示, 在裸鼠原位肝癌肺转移模型中, 敲低SIRT2基因可以通过激活AKT的表达影响GSK3β/β-catenin信号通路, 从而抑制人肝癌细胞的生长和肺转移。

 

关键词  肝细胞癌; 肝癌肺转移; 生长; SIRT2

 
收稿日期: 2017-8-16  接受日期: 2017-12-6
国家自然科学基金(批准号: 81472271、81672012)
 

*通讯作者。Tel: 023-68486780, E-mail: yixin_xinyuan@163.com

 
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