第40卷 第1期(2018年1月):71-81 DOI:10.11844/cjcb.2018.01.0123

 

DHA联合5-FU通过Rho/ROCK调控胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的体外实验

 

王柯柯1 蒋亦燕2 洪 丹1 楼哲丰1 金龙金1*

 

(1温州医科大学检验医学院, 生命科学学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 温州 325035;2温州医科大学附属第一医院, 温州 325000)

 

摘要  该文研究了二十二碳六烯酸(doeosahexaenoic acid, DHA)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)对胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡及其Rho家族基因表达的影响。实验分为对照组、DHA组、5-FU组和DHA联合5-FU组, 用CCK-8法分别检测药物作用24、48、72 h后对人胃癌细胞增殖的抑制作用, 流式细胞术检测细胞凋亡情况, Real-time PCR和Western blot分别检测细胞RhoA、RhoC和ROCK1的mRNA水平和蛋白质水平。结果显示, 5-FU单独作用时, 随着作用时间延长和剂量加大, 对胃癌细胞的增殖抑制作用增强, DHA单独作用时, 低浓度抑制作用不明显, 较高浓度时有显著抑制作用, 40 μg/mL DHA与4 μg/mL 5-FU联合时有明显的增效作用。与对照组相比, 40 μg/mL DHA对细胞凋亡作用不明显, 60 μg/mL DHA主要引起细胞晚期凋亡, 16 μg/mL 5-FU主要引起细胞早期凋亡, 两者联合时对细胞晚期凋亡有显著的增强作用。与对照组相比, DHA组及5-FU组RhoA mRNA水平下降, 5-FU及联合组RhoC mRNA水平升高。与对照组相比, DHA组RhoA、RhoC蛋白质水平下降, 5-FU组RhoA、ROCK1蛋白质水平下降, 而联合组RhoA蛋白质水平下降显著。综上所述, DHA联合5-FU可增强对胃癌SGC7901细胞增殖的抑制作用, 两者作用于细胞凋亡的不同时期且联合用药对晚期凋亡有增强作用。DHA与5-FU联合应用对细胞增殖和凋亡作用机制可能通过抑制RhoA蛋白表达起作用。

 

关键词  二十二碳六烯酸; 5-氟尿嘧啶; Rho; 细胞凋亡

 
收稿日期: 2017-4-26  接受日期: 2017-10-30
浙江省自然科学基金(批准号: LQ14H160019)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 0577-866899359, E-mail: 1304071636@qq.com

 
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