第39卷 第4期(2017年4月):410-418 DOI:10.11844/cjcb.2017.04.0361

 

miR-155通过下调BMP9/Smad信号通路抑制间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化

 

刘红霞 施 琼 安利钦 周一青 张汝益 严树涓 翁亚光*

 

(重庆医科大学检验医学院, 临床检验诊断学教育部重点实验室, 重庆 400016)

 

摘要  该文研究了在诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化过程中miR-155的作用及其是否是通过调控BMP9/Smad(bonemorphogenetic protein 9/drosophila mothers against de-capentaplegic)信号通路发挥作用。在诱导C3H10T1/2细胞成骨分化过程中, 采用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR, qRT-PCR) 检测miR-155水平的变化。转染miR-155模拟剂(miR-155)至C3H10T1/2细胞后, miR-155水平显著增高(P<0.001), 而转染其抑制剂(anti-miR-155)至C3H10T1/2细胞后, miR-155水平显著降低(P<0.001)。转染后成骨诱导培养基诱导成骨7 d, 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性及染色结果显示, miR-155能显著降低C3H10T1/2细胞成骨分化过程中的ALP活性(P<0.01)、减弱ALP染色, 而anti-miR-155则能逆转其作用。成骨诱导14 d茜素红S染色结果显示, miR-155组钙盐结节较对照组少, 下调miR-155的水平后, 钙盐沉积结节增多。qRT-RCR检测结果显示, miR-155显著降低BMP9 mRNA水平(P<0.001), 且miR-155组成骨基因Runx2和ALP表达均显著低于对照NC组(P<0.05、P<0.01)。Western blot检测BMP9、Runx2和p-Smad1/5/8蛋白质水平,结果显示, miR-155组蛋白质水平均显著降低(P<0.01、P<0.05、P<0.001)。该研究结果提示, miR-155对C3H10T1/2细胞成骨分化的抑制作用可能是通过抑制BMP9/Smad信号通路发挥作用的。

 

关键词  miR-155; C3H10T1/2细胞; 成骨分化

 
收稿日期: 2016-12-14  接受日期: 2017-1-20
国家自然科学基金(批准号: NSFC81672103、NSFC31200971)、教育部高等学校博士点基金(批准号: 20115503110009)和重庆市渝中区科委科技项目(批准号:20130136)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 023-68485938, E-mail: yaguangweng@126.com

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