第38卷 第11期(2016年11月):1325-1334 DOI:10.11844/cjcb.2016.11.0169

 

DMSO联合高糖体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的研究

 

于文浩 王亚丹 虎 啸 张 宁 薛永康 朱邯豫 赵玉玺 王新庄*

 

(河南农业大学牧医工程学院, 郑州 450002)

 

摘要  该研究旨在探索二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide, DMSO)联合高糖体外诱导日本大耳白兔(Lepus brachyurus)骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)分化为胰岛样细胞的可行性及其调控机制。采用不含血清的DMSO联合高糖诱导P3代兔BMSCs分化为胰岛样细胞。倒置显微镜下观察细胞的形态变化; 双硫腙染色和免疫荧光染色检测细胞分化; RTqPCR检测胰岛细胞相关基因[Foxa2(forkhead box A2)、Nestin(neuroepithelial stem cell protein)、Pax6(paired box gene 6)、Pdx-1(pancreatic duodenal homeobox-1)、胰岛素]的表达, 并以诱导培养前(0 d)细胞、兔骨髓细胞、P3代BMSCs和胰腺组织中胰岛细胞相关基因表达情况作为参照。结果表明, Foxa2、Nestin和Pax6基因不能作为兔BMSCs向胰岛样细胞诱导分化成功的标志基因。DMSO能够激活Pdx-1基因的表达, 促进兔BMSCs分化为可分泌胰岛素的胰岛前体细胞。高糖能够促进兔BMSCs分化为胰岛样细胞, 并可显著促进Pdx-1和Foxa2基因的表达。

 

关键词  兔; 骨髓间充质干细胞; 二甲基亚砜; 高糖; 分化; 胰岛样细胞

 
收稿日期: 2016-5-13  接受日期: 2016-9-14
国家高新技术研究发展计划(863计划)(批准号: 2008AA101010)和河南省基础与前沿技术研究计划基金(批准号: 092300410081)资助的课题
 

*通讯作者。0371-63558180, E-mail: happywang169@sohu.com

 
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