第38卷 第7期(2016年7月):821-828 DOI:DOI: 10.11844/cjcb.2016.07.0066

 

SIRT6基因沉默对裸鼠异位移植人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

 

周洪钟 陶娜娜 陈 祥 任吉华 李宛蔚 刘 波 陈 娟*

 

(重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室, 重庆 400016)

 

摘要  该文旨在探讨沉默信息调节因子6(silent information regulator 6, SIRT6)基因沉默对裸鼠异位移植人肝癌细胞增殖和凋亡的影响。构建稳定细胞系SIRT6-shRNA-SK-Hep-1和shCont-SKHep-1, 并应用定量逆转录PCR(qRT-PCR)和Western blot检测SIRT6基因的表达水平; 将稳定转染细胞注入裸鼠皮下, 实时监测裸鼠移植瘤的生长, 7周后剥离出裸鼠移植瘤并称重; 免疫组织化学分析SIRT6、Ki-67的蛋白质水平。进一步应用qRT-PCR检测SIRT6基因沉默对下游靶向分子凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins, IAPs)家族的影响; Western blot检测X连锁凋亡抑制蛋白(X-linkedinhibitor of apoptosis protein gene, XIAP)和多腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白质水平。结果显示, 成功构建了沉默SIRT6基因的SK-Hep-1稳定细胞系; SIRT6-shRNASK-Hep-1组裸鼠移植瘤体积和质量较shCont-SK-Hep-1组均减少(P<0.01); 免疫组织化学发现,SIRT6-shRNA-SK-Hep-1组Ki-67水平下调; 沉默SIRT6基因下调XIAP mRNA和蛋白质水平, 并增加PARP蛋白质的剪切水平。该研究结果提示, SIRT6基因沉默可能通过下调XIAP的表达抑制裸鼠异位移植人肝癌细胞的生长。

 

关键词  肝细胞癌; SIRT6; XIAP; 移植瘤; 生长

 
收稿日期: 2016-2-29  接受日期: 2016-5-19
国家自然科学基金(批准号: 81472271、81270559)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 023-68486780, E-mail: yixin_xinyuan@163.com

 
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