第38卷 第7期(2016年7月):786-793 DOI:DOI: 10.11844/cjcb.2016.07.0061

 

电转系统介导的荧光素酶稳定表达PANC-1细胞的构建及其生物发光成像检测

 

屠 珏 黄 宇 凌 云 齐月寒 陈民利*

 

(浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学中心, 杭州 310053)

 

摘要  在构建稳定表达荧光素酶的人胰腺癌PANC-1细胞的基础上, 建立适合活体成像研究的胰腺癌动物模型, 为深入研究胰腺癌发病机制打下基础。该研究运用Lonza NucleofectorTM核转染系统将携带有荧光素酶基因(firefly luciferase, luc)的质粒(GV258)稳定转染PANC-1细胞, 利用嘌呤霉素筛选出能稳定表达荧光素酶的细胞株PANC-1-LUC, 并应用活体成像系统对其体内外生物发光进行检测。进一步构建PANC-1-LUC裸鼠皮下移植瘤, 同样方法接种慢病毒载体构建的PANC-1-luc细胞作为对照, 观察成瘤率、瘤体积, 检测生物发光强度。体内外生物发光检测结果均显示, 光通量值与细胞数之间呈显著的直线相关(P<0.01)。PANC-1-LUC细胞皮下接种裸鼠, 1周成瘤率即达80%以上, 瘤体积可达平均100 mm3。观察6周, 裸鼠皮下肿瘤生长符合Gompertzian曲线。每周的生物发光检测结果均显示, PANC-1-LUC移植瘤的光强度与瘤体积有显著的线性关系(P<0.05)。以上结果说明, 该文所构建的PANC-1-LUC细胞株能够稳定、长期地表达荧光素酶, 更适合构建活体成像研究的裸鼠胰腺癌模型。

 

关键词  Nucleofector核转染系统; 荧光素酶; PANC-1细胞; 生物发光

 
收稿日期: 2016-2-24  接受日期: 2016-5-20
浙江中医药大学比较医学创新团队项目(批准号: XTD201301)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 0571-86613662, E-mail: cmli991@aliyun.com

 
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