第38卷 第1期(2016年1月):32-39 DOI:10.11844/cjcb.2016.01.0299

 

炎症状态下高脂通过NPC1介导内质网应激致足细胞损伤机制研究

 

熊 晓 肖 蕾 杨雪钧 闫俊丽 阳海平 李 秋*

 

(重庆医科大学附属儿童医院肾脏免疫科, 儿童发育疾病研究教育部重点实验室, 儿科学重庆市重点实验室, 儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地, 重庆 400014)

 

摘要  该研究观察了炎症状态下高脂介导的内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)在足细胞损伤中的作用, 并探讨了胞内胆固醇转运蛋白C型1类尼曼−匹克蛋(Niemann-pick C1 protein, NPC1)介导脂质紊乱致ERS的分子机制。将足细胞分为对照组、高脂组(low-density lipoprotein, LDL)、高脂+炎症因子组(LDL+IL-1β)、衣霉素干预组(TM) 、4-苯基丁酸(4-PBA)干预组、辛伐他汀干预组(Statin)。流式细胞术检测足细胞凋亡, 油红O染色检测足细胞胞内脂质沉积,荧光定量PCR检测NPC1、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase, PERK)和活化转录因子6(activating transcription factor 6, ATF6) mRNA水平; 荧光免疫技术分析GRP78的表达。结果表明, 在高脂基础上, 随炎症因子浓度增大和处理时间延长, 足细胞的凋亡率明显上升。胞内脂质沉积以及GRP78、PERK、ATF6、NPC1 mRNA的表达在高脂加炎症因子组明显上升。与高脂加炎症因子组比较, 小剂量衣霉素预处理和4-PBA能降低细胞凋亡比例, 降低GRP78、PERK和ATF6 mRNA的表达, 且4-PBA明显减弱GRP78荧光表达。辛伐他汀和4-PBA可以降低胞内脂质沉积和NPC1 mRNA的表达。以上结果说明, 炎症状态下脂质可能通过NPC1过度转运到内质网并诱发ERS引起足细胞损伤, 缓解内质网应激和降低胞内脂质沉积能减轻足细胞损伤。

 

关键词  炎症; 高脂; 足细胞; 胆固醇转运; 内质网应激; 细胞凋亡

 
收稿日期: 2015-9-16  接受日期: 2015-12-11
国家自然科学基金(批准号: 81270802)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 023-63603929, E-mail: liqiu809@126.com

 
您是第 位访问者,欢迎!
主 办:中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国细胞生物学学会
协办: 上海国联干细胞技术有限公司 上海赛傲生物技术有限公司
地 址:上海徐汇区岳阳路319号31号楼A楼303室 邮编:200031 电话:021-54920950 / 2892 / 2895 Email:cjcb@sibs.ac.cn
沪ICP备05017545号