第31卷 第3期(2009年6月):437-442

 

一种改良的小鼠肝窦内皮细胞的分离、纯化、培养及鉴定方法

 

刘 彪1,2 傅童生1 唐 丽2* 贺福初2*

 

(1湖南农业大学动物医学院, 长沙410128; 2军事医学科学院放射与辐射医学研究所, 北京蛋白质组研究中心, 蛋白质组学国家重点实验室, 北京102206)

 

摘要  采用改进的胶原酶灌注方法结合Percoll密度梯度离心加anti-LSEC microbeads免疫磁珠分离纯化小鼠肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells, LSECs), 台盼蓝染色测定细胞活力, 光镜下观察培养细胞的形态学变化, 流式细胞仪分析其纯度, RT-PCR方法检测其新的特征性分子LSECtin基因的表达。结果表明: 此方法分离的小鼠LSECs得率为(5±0.2)×106个/只小鼠, 台盼蓝染色活力≥95%, 流式细胞仪分析其纯度达到91.92%, 光镜下观察细胞形态典型, RT-PCR检测到新的特征分子LSECtin基因的表达。本研究建立了一种小鼠LSECs的分离、纯化、培养及鉴定方法, 为其功能和作用机制的深入研究打下了基础。

 

关键词  肝窦内皮细胞; 分离; LSECtin

 
 

*通讯作者。Tel: 010-68177417, 010-80727777-1242, E-mail:hefc@nic.bmi.ac.cn, tangli08@yahoo.com.cn

 
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