第36卷 第1期(2014年1月):75-80 DOI:10.11844/cjcb.2014.01.0281

 

RNAi干扰Shp2基因对K562细胞增殖的抑制效应

 

王灿蔚1 陶 崑1* 齐杰玉1 邓一平2

 

(1重庆医科大学基础医学院免疫学教研室, 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心, 重庆 40016;2重庆医科大学实验中心, 重庆 40016)

 

摘要  通过RNA干扰技术沉默蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2基因, 构建重组质粒, 采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法、Western blot、MTT法、流式细胞术(FCM)分别检测转染后K562细胞中bcr/abl融合基因、bcr/abl融合蛋白的表达水平、细胞生长增殖变化及细胞凋亡率, 探索该基因的沉默表达对K562细胞的抑制作用。结果表明, 该实验成功构建出能明显下调Shp2基因及其蛋白表达的重组质粒, 转染K562细胞后, 其bcr/abl融合基因及融合蛋白水平均明显降低、K562细胞增殖活力被抑制(P<0.05)、细胞凋亡水平上升(P<0.05)。与对照组相比, 其差异具有统计学意义。提示,重组质粒可显著降低bcr/abl基因及蛋白的表达, 抑制K562细胞的生物学效应, 表明在细胞水平沉默Shp2有可能成为治疗慢性粒细胞白血病的有效靶点。

 

关键词  慢性粒细胞白血病(CML); bcr/abl; Shp2; K562细胞

 
收稿日期: 2013-9-2  接受日期: 2013-11-6
重庆市科委(批准号: CSTC: 2010BB5369)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 023-68485813, E-mail: taokun68@126.com

 
您是第 位访问者,欢迎!
主 办:中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国细胞生物学学会
协办: 上海国联干细胞技术有限公司 上海赛傲生物技术有限公司
地 址:上海徐汇区岳阳路319号31号楼A楼303室 邮编:200031 电话:021-54920950 / 2892 / 2895 Email:cjcb@sibs.ac.cn
沪ICP备05017545号