第36卷 第1期(2014年1月):60-68 DOI:10.11844/cjcb.2014.01.0304

 

叶酸靶向载顺铂羧甲基-β-环糊精纳米复合物的制备及对鼻咽癌的体外抑制效应

 

刘 涛1 马 栋2 柯 波3 谢民强1*

 

(1南方医科大学珠江医院耳鼻咽喉头颈外科, 广州 510282; 2暨南大学生物医学工程系, 广州 510630;3江西省人民医院江西血液肿瘤细胞生物学重点实验室, 南昌 330006)

 

摘要  为达到鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)的靶向化疗, 该研究通过酰胺化反应和配位偶联技术制备叶酸(folic acid, FA)分子靶向载顺铂(cisplatin, CDDP)羧甲基-β-环糊精(carboxymethyl-β-cyclodextrin, CM-β-CD)纳米复合物(FA-CM-β-CD-CDDP), 采用邻苯二胺(o-phenylenediamine, OPDA)比色法检测复合物中CDDP含量, 紫外分光光谱检测FA含量, 透射电镜观察复合物形态, 激光粒度仪测定复合物粒径大小。荧光显微镜观察NPC叶酸受体(folate receptor, FR)阳性HNE-1细胞及FR阴性CNE-2细胞对偶联FITC的复合物的吞噬及OPDA比色法检测细胞内CDDP的浓度。通过MTT法、集落形成实验和流式细胞术检测复合物对HNE-1细胞增殖能力和凋亡的影响。研究结果显示, 复合物中偶联的FA和CDDP浓度分别为340 μg/mL和2 mg/mL, CDDP包封率达20.00%, 复合物粒径均匀且大小为157.8 nm。HNE-1细胞内见较多FITC, 细胞内CDDP浓度为6.24 ng/mL, 而CNE-2细胞内FITC较少, 细胞内CDDP浓度仅约2.01 ng/mL。HNE-1生长抑制率在24 h明显高于对照组(CM-β-CD-CDDP), 其IC50(4.80 μg/mL)明显低于对照组(6.97 μg/mL), 但当所载的CDDP终浓度达到16.00 μg/mL时, 两组抑制率均达到80%以上; 作用48 h两组抑制率无明显差异。在24 h, 当复合物的CDDP终浓度为1.00 μg/mL时, HNE-1的集落形成率为33.21%, 明显低于对照组(52.27%)。当复合物的CDDP终浓度为0.25 μg/mL和1.00 μg/mL时, HNE-1的凋亡率分别达12.65%和22.35%, 明显高于对照组(6.91%和14.21%)。研究结果表明, 成功构建的FA-CM-β-CD-CDDP纳米复合物能够靶向抑制FR阳性的NPC细胞增殖并促进其凋亡。

 

关键词  叶酸; 分子靶向; 纳米复合物; 鼻咽癌; 顺铂

 
收稿日期: 2013-9-21  接受日期: 2013-11-6
国家自然科学基金(批准号: 81372477、81260406)、教育部高等学校博士学科点专项科研基金(批准号: 20114433110001)和江西省自然科学基金(批准号:20122BAB205068)资助的课题
 

*通讯作者。Tel: 020-61643389, E-mail: min_qiang_x@hotmail.com

 
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