第34卷 第2期(2012年2月):113-119

 

核糖体蛋白rpS6在核仁中的定位与其磷酸化无关

 

张 朵1,2 高丽华1 邵 勇1 郗永义1 胥照平1 陈惠鹏1 胡显文1*

 

(1军事医学科学院生物工程研究所, 北京 100071; 2南京军区福州总医院实验科, 福州 350025)

 

摘要  核糖体蛋白S6(rpS6)是核糖体小亚基40S的一个组成成分。在该研究中, 利用免疫荧光和邻位连接技术证明rpS6不仅是核糖体小亚基的组成成分, 而且还可与核仁中的U3核蛋白复合体的标志性蛋白Mpp10共定位并且存在相互作用。rpS6蛋白的C端有5个丝氨酸磷酸化位点, 为了研究rpS6蛋白在核仁中的分布是否与其磷酸化有关, 构建了rpS6蛋白的两个突变体rpS6A和rpS6D分别与EGFP和HA的融合蛋白。rpS6A是将C端的5个丝氨酸位点全部突变为丙氨酸; rpS6D是将C端的5个丝氨酸位点全部突变为天冬氨酸。研究表明: rpS6、rpS6A和rpS6D与EGFP和HA的融合蛋白均可分布在核仁中, 与内源性rpS6蛋白的分布情况一致, 说明rpS6蛋白在核仁中的定位与其磷酸化无关, 为探索rpS6蛋白在核仁中的功能奠定了良好的基础。

 

关键词  核糖体蛋白S6; 邻位连接技术; U3核蛋白复合体

 
收稿日期: 2011-9-5  接受日期: 2011-11-8
 

*通讯作者。Tel: 010-66948820, E-mail: huxianwen2002@yahoo.cn

 
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