第32卷 第4期(2010年8月):596-600

 

RNAi 抑制Smad4 基因表达对猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响

 

张海燕 王 伟 贺 彧 王 莉 田宽校 宋晓光 徐银学*

 

(南京农业大学动物科技学院, 南京 210095)

 

摘要  Smad蛋白家族是TGF-β/Smad信号通路中的重要成员, 其中Smad4在该信号转导途径中起着关键作用。本研究利用RNAi技术沉默Smad4基因, 探讨其对猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响。设计并合成靶向Smad4的小分子干扰RNA, 在脂质体的介导下转染猪卵巢颗粒细胞, 荧光定量PCR检测Smad4 mRNA的表达情况; MTT(四甲基偶氮唑盐)比色法分析检测细胞活性; TUNEL(原位末端核苷酸标记法)及Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况; 荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax的mRNA 表达水平。研究显示, Smad4-siRNA 能有效抑制Smad4 的mRNA 表达(P<0.01), 细胞活性由0.31 减少到0.27, 凋亡率由17.0% 增加到22.1%, Bcl-2 的mRNA 表达显著下调。结果说明沉默Smad4 基因可以促进猪卵巢颗粒细胞的凋亡, 其机制可能与调控Bcl-2 表达有关。

 

关键词  猪卵巢颗粒细胞; Smad4; RNA干扰; 细胞凋亡

 
收稿日期: 2009-11-9  接受日期: 2010-6-28
国家高技术研究发展计划课题(No.2006AA10Z136)资助项目
 

*通讯作者。Tel: 025-84365362, E-mail: xuyinxue@njau.edu.cn

 
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