第32卷 第4期(2010年8月):527-532

 

Nephrin 分子细胞内吞转运途径的研究

 

秦晓松* 刘 勇 吴丽娜 刘建华 王丹丹

 

(中国医科大学附属盛京医院检验科, 沈阳110004)

 

摘要  为研究nephrin分子在细胞内的转运途径, 探讨其在维持肾小球裂孔膜完整性上的作用, 构建了nephrin 真核表达载体, 并转染至COS-7 细胞内, 应用免疫荧光三重标记的方法,分别进行细胞内及细胞表面的荧光标记, 联合笼型蛋白介导的内吞(clathrin-mediated endocytosis, CME)和脂筏介导的内吞(raft-mediated endocytosis, RME)标记物,通过共聚焦显微镜对裂隙膜分子nephrin在不同时间点细胞内的内吞转运特点进行研究。结果发现在转运启动2 min 时, 68.44%±4.65% 的nephrin 通过CME 途径进行细胞内转运; 在20 min 时, 65.24%±4.02% 的nephrin 以RME 途径进行转运, 并且两种转运途径均可被相关途径抑制物所阻断。表明nephrin通过两种途径进行细胞内转运, 提示不同的转运途径可能与其实现不同功能有关。

 

关键词  nephrin; 免疫荧光技术; 蛋白质转运

 
收稿日期: 2010-5-21  接受日期: 2010-7-22
辽宁省自然科学基金(No.20082095 )和辽宁省高校科研计划(No.L20100610)资助项目
 

*通讯作者。Tel: 024-96615-72116, E-mail: qinxs@sj-hospital.org

 
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