第32卷 第3期(2010年6月):361-369

 

缺血心脏成纤维细胞构建工程化心肌样组织的研究

 

董 悦 张 雷* 邵素霞 尹 青 陈 炜 赵春芳

 

(河北医科大学组织胚胎教研室, 石家庄050017)

 

摘要  采用5 μmol/L 5- 氮胞苷(5-azacytidine, 5-aza)诱导Wistar 大鼠缺血心脏成纤维细胞(fibroblasts of ischemia myocardium, FIMs)分化为心肌样细胞, 利用抗心肌特异性肌钙蛋白(cardiacTroponin T, C-TnT)和抗α- 横纹肌肌动蛋白(α-sarcomeric actin, α-SA)间接免疫荧光标记, 透射电镜以及Real-time PCR 检测血管紧张素原(angiotensinogen, AGT)和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)mRNA含量, 鉴定诱导分化的心肌样细胞。采用扫描电镜鉴定两种不同支架组织(脱细胞大肠肌膜和脱细胞胶原膜), 将心肌样细胞分别接种于两种支架组织上生长5~7 天, 利用抗C-TnT, α-SA间接免疫荧光和扫描电镜, 观察工程化心肌样组织生长情况。结果发现, 诱导分化的心肌样细胞胞质内含有丰富的肌微丝, 对抗C-TnT 和α-SA 间接免疫荧光标记反应阳性, Real-time PCR 检测显示心肌样细胞内AGT 和BNP mRNA 表达明显高于对照组FIMs, 差别有显著性(P<0.05)。在两种不同支架组织上生长, 心肌样细胞呈多边形有突起或柱状分支状片状平铺排列, 对抗C-TnT和α-SA反应阳性, 细胞胞浆内可见肌微丝。研究表明, FIMs 能诱导分化为心肌样细胞, 在不同支架组织上生长, 构建工程化心肌样组织。

 

关键词  成纤维细胞; 心肌样细胞; 支架; 组织工程

 
收稿日期: 2010-3-25  接受日期: 2010-5-26
河北省自然科学基金(No.C2008001030)资助项目
 

*通讯作者。Tel: 0311-86266719, E-mail:zhanglei@hebmu.edu.cn

 
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