第32卷 第1期(2010年2月):149-154

 

细胞骨架染色中不同固定方法的探讨

 

张 维 骞爱荣 高 翔 胡丽芳 瓮媛媛 韩 晶 商 澎*

 

(西北工业大学生命科学院, 西北工业大学特殊环境生物物理学研究所,空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室, 西安 710072)

 

摘要  探讨不同细胞固定方法对细胞骨架染色的影响, 以期发现适合于微丝与微管细胞骨架染色的固定方法。本文分别采用0.5%戊二醛、95%乙醇、4%甲醛及无水冷丙酮等四种固定液对人骨肉瘤细胞MG-63进行固定, 然后分别对微丝和微管进行染色、封片, 采用激光共聚焦扫描显微镜观察细胞微丝及微管骨架的形态。同时采用图像分析方法对细胞骨架微丝、微管荧光图像进行定量分析。结果表明, 0.5%戊二醛固定的细胞, 微丝呈清晰的束状纤维, 微管呈有规律的束状纤维; 95%乙醇固定的细胞, 微丝纤维连贯性差, 微管纤维非常清晰; 4%甲醛固定的细胞, 微丝纤维之间比较模糊, 微管纤维呈圆弧状, 联贯性较差; 无水冷丙酮固定的细胞, 微丝明显皱缩, 呈模糊状, 微管清晰可见, 连贯性较好。因此, 不同固定液固定的原理不同, 要根据实验目的, 选择合适的固定方法。

 

关键词  细胞骨架; 固定方法; 激光共聚焦显微术; 人骨肉瘤细胞

 
收稿日期: 2009-8-7  接受日期: 2010-1-6
国家高技术研究发展计划(863计划) (No.2008AA12A218)和国家自然科学基金(No.30840030)资助项目
 

*通讯作者。Tel: 029-88460391, Fax: 029-88491671, E-mail: shangpeng@nwpu.edu.cn

 
您是第 位访问者,欢迎!
主 办:中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国细胞生物学学会
协办: 上海国联干细胞技术有限公司 上海赛傲生物技术有限公司
地 址:上海徐汇区岳阳路319号31号楼A楼303室 邮编:200031 电话:021-54920950 / 2892 / 2895 Email:cjcb@sibs.ac.cn
沪ICP备05017545号