第32卷 第1期(2010年2月):61-68

 

MSCs心肌样细胞分化过程中GCN5募集促分化相关蛋白的筛选

 

周 娜1 朱 静1* 田 杰2 李娅莎1 邓 兵1 张亚兰1 智深深1

 

(重庆医科大学附属儿童医院, 1儿科研究所, 2心血管内科, 重庆400014)

 

摘要  筛选并分析间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)诱导分化为心肌样细胞过程中GCN5招募促分化相关蛋白集合体的组成。免疫荧光细胞化学、实时荧光定量PCR鉴定MSCs经5-氮杂胞苷(5-azacytidine, 5-azaC)诱导分化为心肌样细胞; 免疫共沉淀技术分离、串联质谱鉴定GCN5募集蛋白集合体组成, 并从心肌细胞分化角度筛选、验证分化相关蛋白因子。MSCs经5-azaC诱导分化的心肌样细胞表达心肌特异性基因GATA4、MEF2C和心肌细胞结构、功能蛋白cTnt、MHC和Cx43; 筛选、验证出心肌细胞分化相关GCN5招募蛋白归类为: (1) DNA结合蛋白Sp1/KLF; (2)转录辅激活子PGC-1a和Rb1; (3)转录延伸复合体组成成分以及信号通路蛋白Akt。通过筛选获得MSCs经诱导向心肌样细胞分化过程中心肌分化相关蛋白因子, 为进一步研究干细胞分化信号传导途径、特异性生物靶点干预以及提高干细胞分化效率打下了基础。

 

关键词  间充质干细胞; 分化; 组蛋白乙酰转移酶GCN5; Co-IP; MS/MS

 
收稿日期: 2009-9-3  接受日期: 2010-1-18
国家自然科学基金资助项目(No.30973219)
 

*通讯作者。Tel: 023-63630294, E-mail: zhujing310@yahoo.com.cn

 
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