第31卷 第6期(2009年12月):863-866

 

CCL20基因敲低型人永生化角质形成细胞克隆的体外生长特性观察

 

何 斌 彭代智* 何升东 周 新 刘 敬 王 勇 王丽华 郑必祥 左海斌

 

(第三军医大学西南医院全军烧伤研究所, 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室, 重庆400038)

 

摘要  采用MTT比色法、碘化丙啶染色法和直接免疫荧光双标记法分别观察 4个CCL20基因敲低型人永生化角质形成细胞(HaCaT 细胞)克隆(代号分别为II~V)的生长曲线、细胞周期以及表皮干细胞相关表型, 预期筛选出体外生物学性状良好的表皮种子细胞克隆。结果显示, 与未转染的HaCaT细胞(代号为I)比较, III~V在体外培养第5、6天的光密度值显著降低; III和IV的G2+M期显著增多; IV和V表达CD49f+CD71-的百分率显著升高, 而表达CD49f+CD71+、CD71+ 的百分率显著降低。可见, 4个CCL20基因敲低型HaCaT细胞克隆中仅有II表现出与未转染 HaCaT类似的体外生长特性, 该克隆有可能成为构建低免疫原性组织工程皮肤的表皮种子细胞。
    

 

关键词  角质形成细胞; 基因敲低; 生长曲线; 细胞周期; 干细胞表型

 
收稿日期: 2009-7-23  接受日期: 2009-11-6
国家重点基础研究发展计划(973计划) (No.2005CB522605)、国家高技术研究发展计划(863计划) (No.2006AA02A121)资助项目
 

*通讯作者。Tel: 023-68754226, E-mail: dzpengmd@126.com

 
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