第31卷 第6期(2009年12月):823-830

 

骨髓干细胞诱导形成的内皮细胞在体内外环境中的稳定性

 

董 悦 张 雷* 邵素霞 尹 青 陈 炜 赵春芳

 

(河北医科大学组织胚胎教研室, 石家庄050017)

 

摘要  采用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记的CD34 (FITC-CD34)、免疫细胞化学及透射电镜鉴定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)诱导Sprague-Dawley (SD)大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs)分化形成的内皮细胞(诱导组)。应用三维脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix, ADM)支架组织, 接种诱导形成的内皮细胞, 种植于SD大鼠体内生长14天。同时采用不含VEGF的DMEM (DMEM组)和EGM-2培养基(EGM-2组), 体外培养诱导形成的内皮细胞14天, 酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测各组细胞上清液中内皮素(endothelin-1, ET-1)和VIII因子相关抗原(VIII factor related antigen, F-VIIIAg)含量, 进行统计学处理。实验结果表明, VEGF诱导BM-MSCs培养14天, 细胞呈“铺路石”样排列, FITC-CD34呈现绿色荧光, 免疫细胞化学抗CD31和CD34表达阳性, 细胞质中含Weibel-Palade小体, 具有内皮细胞的特征。在SD大鼠体内生长7天和14天, 内皮细胞保留其特征, 对抗CD31和CD34表达阳性。内皮细胞在体外不含VEGF的DMEM培养基和EGM-2培养基中各培养14天后, 细胞回复到诱导前状态, FITC-CD34反应阴性。ELISA检测DMEM组和EGM-2组中ET-1和F-VIIIAg含量明显低于诱导组( P<0.05)。研究结果显示, BM-MSCs诱导形成的内皮细胞, 在体内环境中生存能保留其特征; 但在缺乏VEGF诱导的体外培养基中生长, 不能维持其特征。

 

关键词  骨髓干细胞; 内皮细胞; 诱导; 血管内皮生长因子

 
收稿日期: 2009-8-19  接受日期: 2009-11-12
河北省自然科学基金资助项目(No.C2008001030)
 

*通讯作者。Tel: 0311-86266719, E-mail: zhanglei@hebmu.edu.cn

 
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