第31卷 第5期(2009年12月):731-734

 

成人食管上皮细胞的原代培养方法

 

孙 巍1 李月红1,2* 张祥宏1 严 霞1 曹富民1 王俊灵1 王 娟1 姚志刚1

 

(1河北医科大学实验病理室, 石家庄050017; 2河北医科大学第二医院病理科, 石家庄050000)

 

摘要  探讨一种简便实用、成本低、纯度高并且成熟稳定的成人食管上皮原代培养的方法。成人食管上皮细胞来源于食管癌患者手术切除食管的正常黏膜上皮。采用组织块法, 分别在DMEM/F12混合培养基和1640培养基中培养成人正常食管上皮细胞。通过直接观察、细胞形态学观察和免疫细胞化学方法观察细胞的生长情况、细胞形态学特征及鉴定所得到的细胞。结果表明, 与1640培养基相比, 应用DMEM/F12混合培养基具有明显的优越性。正常食管上皮细胞在DMEM/F12混合培养基中生长较好, 细胞融合快, 成纤维细胞污染少, 可以生长成为典型的“铺路石”样, 可连续培养21天, 组织块最多可以被迁移4次, 且细胞生长状态良好。免疫细胞化学染色鉴定证实95%的细胞具有广谱细胞角蛋白, 即确定是食管上皮来源的细胞。本研究应用改良的组织块法培养的正常食管上皮细胞纯度高、产量较大, 可以满足正常食管上皮细胞恶性转化方面的研究工作, 而且方法简便易行、成熟稳定, 是一种适合推广应用的正常食管上皮细胞培养方法。

 

关键词  食管; 上皮细胞; 细胞培养

 
收稿日期: 2009-1-9  接受日期: 2009-8-20
河北省自然科学基金资助项目(No.C2005000763)
 

*通讯作者。Tel: 0311-86265561, E-mail: liyuehong1993@tom.com

 
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